Dagli Stati Uniti uno studio focalizzato sull’identificazione dei diversi valori di riferimento a seconda dell’età del neonato al momento del test
Negli ultimi quarant’anni sono stati completati in tutto il mondo diversi studi pilota sugli screening neonatali (NBS) per la Distrofia Muscolare di Duchenne (DMD) che hanno misurato i livelli di concentrazione di creatina chinasi-MM (CK-MM), un biomarcatore del danno muscolare, analizzando macchie di sangue essiccato (Dried Blood Spot, DBS). Negli Stati Uniti il test neonatale, validato dalla FDA per campioni ottenuti meno di 72 ore dopo la nascita, è sottoposto a valutazione per il Recommended Uniform Screening Panel (RUSP) ed è già obbligatorio in diversi stati. Per questo, secondo uno studio recentemente pubblicato sull’International Journal of Neonatal Screening, è di fondamentale importanza perfezionare gli algoritmi NBS.
In particolare, lo studio ha analizzato la relazione tra età e CK-MM in neonati presumibilmente sani per aggiornare i progetti di algoritmi NBS. Infatti, mentre nei pazienti con DMD la CK-MM è persistentemente elevata nell’infanzia e nell’adolescenza, può essere transitoriamente elevata per altri motivi nei neonati sani. La diminuzione di CK-MM nel tempo è stata dimostrata da un campione di popolazione di 20.306 neonati presumibilmente sani sottoposti a test tra 0 e 60 giorni di vita e da test ripetuti su 53 neonati in due giorni separati. Nel campione di popolazione, la concentrazione di creatina chinasi-MM era più alta nel secondo periodo di vita di 12 ore (mediana = 318 ng/mL) quando solo il 57,6% dei neonati mostrava valori al di sotto di 360 ng/mL. Entro 72 ore di età, la concentrazione mediana di CK-MM era di 97 ng/mL e il 96,0% dei neonati aveva concentrazioni inferiori a 360 ng/mL. Tra 72 ore e 60 giorni, la concentrazione mediana di CK-MM variava da 32 a 37 ng/mL. Da questo emerge come stabilire valori limite correlati all’età sia fondamentale per ottimizzare la sensibilità e la specificità dell’NBS per la DMD.
La maggior parte dei programmi NBS – scrivono i ricercatori – utilizza un modello a uno schermo in cui i neonati vengono sottoposti a screening solo alla nascita, in genere tra le 24 e le 48 ore di vita. Tuttavia, meccanismi di test ripetuti consolidati possono essere utilizzati nello sviluppo di algoritmi NBS per la DMD. Ad esempio, 12 stati degli Stati Uniti utilizzano un modello a due schermi in cui tutti i neonati vengono sottoposti a screening alla nascita e poi una seconda volta tra 1 e 2 settimane di età, spesso durante una visita “di controllo”. Inoltre, la raccolta e il test ripetuti del campione vengono utilizzati in entrambi gli scenari se il campione iniziale non soddisfa i criteri di controllo qualità (ad esempio, scarsa qualità o raccolto prima delle 24 ore di vita) o dopo un risultato iniziale anomalo o borderline.
Diversi studi pilota NBS negli USA hanno riportato vari valori limite CK-MM correlati all’età. Alcuni di questi studi hanno anche determinato valori limite correlati a sesso, peso alla nascita (BW) e termine gestazionale (vale a dire, pretermine vs. termine completo). Non a caso, i programmi di ricerca volontaria NBS dello Stato di New York (NYS) e Early Check NBS di RTI International hanno entrambi implementato valori limite per CK-MM che diminuiscono all’aumentare dell’età alla raccolta del campione.
La natura transitoria dell’iperCKemia non genetica rappresenta quindi un’opportunità per implementare test ripetuti di CK-MM per differenziare i neonati con DMD che presentano iperCKemia sostenuta e per ridurre al minimo i falsi positivi per i neonati i cui livelli di CK-MM si normalizzano entro i primi giorni di vita.
Quanto ricavato dagli oltre 20mila neonati presi a campione dimostra che la raccolta di DBS ripetute dovrebbe avvenire almeno dopo le 72 ore di età, quando il 96% dei neonati ha livelli di CK-MM inferiori al cutoff più basso precedentemente utilizzato. Entro 10 giorni di vita, CK-MM si normalizza per oltre il 99% dei neonati. Dati che, tuttavia, sono riferibili solo all’uso del kit Genetic Screening Processor (GSP) Neonatal Creatine KinaseMM è approvato dalla FDA. Per questo, concludono i ricercatori, ogni programma dovrebbe considerare fattori specifici della popolazione e del programma quando progetta i propri algoritmi, inclusa l’età minima di raccolta DBS in cui il CK-MM transitoriamente elevato si è normalizzato.
